博奧森生物,自2001年誕生以來(lái),始終堅(jiān)守在生命科學(xué)前沿,為全球科研人員提供優(yōu)秀品質(zhì)的免疫學(xué)試劑產(chǎn)品與服務(wù)。經(jīng)過(guò)多年深耕,博奧森已擁有成熟的蛋白表達(dá)、抗體制備、抗體驗(yàn)證、單B細(xì)胞篩選、噬菌體展示、重組抗體及工業(yè)化生產(chǎn)等平臺(tái),為我們的抗體開(kāi)發(fā)奠定了扎實(shí)的基礎(chǔ)。
Bioss始終堅(jiān)持“自主研發(fā)、原始創(chuàng)新”的理念。從多克隆抗體--鼠單克隆抗體—鼠重組單克隆抗體---基于單 B 細(xì)胞分選技術(shù)的重組兔單克隆抗體,Bioss以創(chuàng)新為魂,不斷地進(jìn)行技術(shù)升級(jí)與迭代。Bioss Rrmab®重組兔單克隆抗體 {R:Reliable(可靠的);r:Recombinant(重組);mab:Monoclonal antibodies (單克隆抗體)},為廣大科研工作者提供更多高品質(zhì)、可靠的抗體產(chǎn)品。單B細(xì)胞的單克隆抗體發(fā)現(xiàn)平臺(tái)
與傳統(tǒng)雜交瘤技術(shù)開(kāi)發(fā)平臺(tái)相比,Bioss搭建的單B細(xì)胞的單克隆抗體發(fā)現(xiàn)平臺(tái)主要是依托于Bioss多年的抗體開(kāi)發(fā)以及豐富的抗體標(biāo)記經(jīng)驗(yàn),利用細(xì)胞分選技術(shù)從免疫的動(dòng)物中分離外周血單核細(xì)胞 (PBMCs) 從而獲得抗原特異性的單個(gè)B細(xì)胞,利用分子生物學(xué)技術(shù)從抗原特異性的B細(xì)胞中獲得抗體序列信息,經(jīng)體外重組表達(dá)、篩選,獲得滿足不同應(yīng)用需求的基因工程重組兔單克隆抗體。Rrmab®重組兔單克隆抗體的優(yōu)勢(shì)
單克隆抗體與多克隆抗體比較,在特異性和性能穩(wěn)定性上優(yōu)勢(shì)明顯;由于兔子具有特別的免疫系統(tǒng),相比其他物種來(lái)源的抗體而言,兔源重組單克隆抗體有以下一些優(yōu)勢(shì):①較高的親和力、較高的檢測(cè)靈敏度、較高的特異性和較高的穩(wěn)定性;
②抗體的多樣化可識(shí)別更多的表位及稀有抗原,如磷酸化抗原、碳水化合物等;特別是對(duì)于一些難開(kāi)發(fā)的翻譯后修飾位點(diǎn)特異性抗體、小分子化合物抗體、核苷酸 (DNA/RNA) 抗體、多糖類(lèi)抗體具有很大優(yōu)勢(shì);
③抗體結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,兔IgG僅有一種亞型,更易于人源化改造;
④重組技術(shù)可提高抗體生產(chǎn)的批次間一致性;
⑤可做到無(wú)動(dòng)物源成分,滿足如抗體藥物等的生產(chǎn)需求。
Rrmab®重組兔單克隆抗體的開(kāi)發(fā)流程
3 抗體的驗(yàn)證
將分選的單個(gè)B細(xì)胞先在體外進(jìn)行5~20板96孔板單B細(xì)胞培養(yǎng),然后將細(xì)胞培養(yǎng)的上清進(jìn)行ELISA、WB、FCM等實(shí)驗(yàn)的驗(yàn)證篩選。
敲除驗(yàn)證(KO驗(yàn)證)是驗(yàn)證抗體的所有方法中可接受性和可信度比較高的
4 陽(yáng)性克隆測(cè)序與表達(dá)
挑選驗(yàn)證數(shù)據(jù)優(yōu)異的陽(yáng)性細(xì)胞克隆進(jìn)行RT-PCR,來(lái)擴(kuò)增其抗體可變區(qū)基因,然后進(jìn)行測(cè)序。最后進(jìn)行抗體的表達(dá)載體構(gòu)建、抗體的表達(dá)。得到重組兔單抗。